首先，培养操作中，要严格遵守无菌操作。所有用具、培养基、试剂都要经过灭菌，而且不能长时间暴露于空气中，要求在超净工作台上进行操作，以防受污染。禁止用手接触或用口吹已灭菌的器皿内部。
刚开始，将取得的抗癌细胞放入培养皿中，再使用特殊的培养环境如红外二氧化碳培养箱(水套式或直热式)，来培养抗癌细胞，因为它控制CO2浓度和温度精度高，高湿度，可以彻底消毒。为细胞营造一个更适宜的培养环境。在24小时的培养时间内，进行观察抗癌细胞的增长和增殖情况，因为，不同的个体增长的情况不一样，因此，通常要用到离心机对样品进行离心分离，筛选出更优良的抗癌细胞进行再培养。
接下来在CO2培养箱中培养大约一周的时间。期间，一般间隔24—48小时观察结果，培养顺利进行后，从二氧化碳培养箱中取出培养皿，在超净工作台上将之导入到离心试管中，再置于离心机水平转桶中进行最后一次的离心分离，这样就可得到肿瘤病人需要的抗癌细胞。
